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UHPLC–MS級溶劑實用指南

2025/12/4 15:56:23  作者:阿拉丁


 

“適用于UHPLC-MS(for UHPLC-MS)”是什么意思

這些溶劑/試劑是專為配合質譜(MS)檢測的超高效液相色譜(UHPLC;< 2µm填料、高壓力)而生產并通過相應QC測試的。其具有極低的非揮發(fā)殘留、ppb級金屬雜質、極低的UV/MS本底以及亞微米級微??刂?,因此即使在痕量水平也能保持色譜柱和離子源的清潔與靈敏。

隨著LC色譜柱粒徑縮?。?lt; 2µm)且系統(tǒng)壓力升高(UHPLC系統(tǒng)可運行至約1,000 bar(≈15,000psi)),溶劑潔凈度與顆??刂频闹匾燥@著提升;與此同時,MS離子源對低離子/有機污染的要求愈發(fā)嚴格。各供應商據(jù)此推出了面向LC-MS且與UHPLC兼容的專用等級,并在純化、質量控制(QC)和包裝環(huán)節(jié)增加了工序。由于沒有統(tǒng)一的外部標準,“LC-MS/UHPLC-MS等級”由供應商自行界定——請務必查閱批次COA(分析證書)。

UHPLC–MS工作流程對污染極其敏感。微量的非揮發(fā)殘留、堿金屬(Na?/K?)、增塑劑或微粒都可能抑制電離、提高化學噪聲、產生加合物,甚至堵塞濾片/色譜柱(frits/columns)。標注“適用于UHPLC–MS”的產品通過以下措施針對性降低這些風險:(a)更嚴格的雜質限度,(b)亞微米級末端過濾/潔凈包裝,以及(c)與方法相關的適用性測試(梯度PDA〔二極管陣列〕、LC–MS本底)。

“適用于UHPLC–MS”相較普通等級的獨特之處:

  • 雙重調校:同時滿足:(1)UHPLC的機械要求(小粒徑/高壓力)與 (2) MS的化學要求(有利電離、超低離子/有機本底)。
  • 結果收益:更高的靈敏度、更潔凈的譜圖、更長的色譜柱/離子源壽命,以及在痕量水平下更佳的基線重現(xiàn)性。

在COA上常見的QC/實驗室測試項目

具體限度因供應商與溶劑而異,但常見測試包括:

  • MS本底(ESI±)——TIC(總離子流)/背景離子低→痕量水平譜圖更干凈
  • 痕量金屬(ICP-MS)——ppb級Na?/K?/過渡金屬→更少加合物、更高靈敏度
  • 蒸發(fā)殘留——mg/L級低殘留→降低離子源結垢
  • UV/梯度基線(200–400nm)——PDA基線平滑→確保UHPLC梯度穩(wěn)定
  • 水分(KF)、含量(assay)、酸度/堿度——組成控制
  • 微粒與末端過濾(0.1–0.2µm——保護< 2µm色譜柱
  • 包裝/內襯——低析出瓶蓋、惰性氣體覆蓋。

阿拉丁具體產品示例

  • 乙腈(Acetonitrile)——適用于UHPLC,適合MS:低黏度、低背壓;已進行MS本底篩查;末端亞微米過濾。小分子ESI?方法的優(yōu)選默認溶劑。
  • 甲酸銨(Ammonium formate)——適用于LC–MS:適用于正/負兩種離子模式的揮發(fā)性緩沖鹽。
  • 氨水(Ammonia solution,25%水溶液)——適用于LC–MS:負離子模式/高pH方法用的揮發(fā)性堿;注意色譜柱pH限度與材料相容性。
  • 水(Water)——適用于UHPLC,適合MS:低TIC;< 0.2µm過濾;通過梯度測試。穩(wěn)定MS基線的關鍵組成。
  • 甲醇(Methanol)——適用于UHPLC,適合MS:與ACN選擇性不同;嚴格微??刂?。適用于酚類化合物及部分ESI?工作流。

與相關等級的比較

等級

主要目的

典型新增測試/特性

適用場景

HPLC grade

低UV/熒光本底,通用色譜

UV截止/透過率,低殘留

采用UV/FLD的HPLC(無MS);日常/常規(guī)工作

HPLC Gradient grade / UHPLC (UV)

在梯度與小粒徑色譜柱上獲得平滑基線

梯度基線測試;精細過濾

使用光學檢測器的快速梯度HPLC/UHPLC

LC-MS grade

面向質譜的靈敏度與潔凈度

MS本底測試;ppb級金屬;低殘留

在標準HPLC或UHPLC上進行LC-MS(/MS)

UHPLC-MS grade

同時滿足UHPLC的機械需求與MS的化學需求

在LC-MS測試基礎上,增加更嚴的顆粒/梯度規(guī)范與UHPLC適用性

< 2µm柱 + MS檢測的最佳選擇

 

選型要點與注意事項

1. 檢測器決定等級:若終端檢測為MS,請選擇LC-MS或UHPLC-MS等級。HPLC級可用于僅UV的方法,但在MS上可能提高噪聲或產生加合物。

2. 使用揮發(fā)性添加劑:優(yōu)選甲酸/乙酸、甲酸銨/乙酸銨;在LC-MS中避免使用磷酸鹽/硼酸鹽/Tris——它們會抬高本底、抑制信號并污染離子源。

3. 謹慎使用TFATFA在僅UV的工作流程中有助于峰形,但會抑制電噴霧電離(ESI)信號;若MS靈敏度重要,請改用FA(甲酸)或采取緩解策略。

4. 系統(tǒng)整體匹配:LC-MS級水與有機相同等重要;管路、瓶蓋與樣品瓶應選用低析出規(guī)格(配PTFE襯墊)以減少浸出物。。

5. 不要指望“混合提升”:不同等級混合后,潔凈度只會等同于最差的那一組分。

6. 儲存與操作:保持嚴密密封,盡量減小頭空間,并使用潔凈的玻璃流路;自配混合溶劑須0.2 預過濾,必要時脫氣。

常見問答(FAQs)

問:我能在普通HPLC上使用UHPLC–MS 等級溶劑嗎?

答:可以——該等級向下兼容。這不會損害系統(tǒng);但若僅做UV檢測,你可能為并不需要的性能多付成本。

問:“LC–MS級”在各品牌間是否有統(tǒng)一標準?

答:沒有全球統(tǒng)一規(guī)范;各供應商會自定合格標準(如金屬項目、MS本底、殘留限度等)。請以所用批次的COA為準。

問:為何用“MS級”溶劑做UHPLC–UV仍會出現(xiàn)基線起伏/鬼峰?

答:“MS級”更強調電離潔凈度;若要獲得梯度UV的平滑基線,請確認該批次通過梯度/PDA測試,或改用專門的梯度/UHPLC等級溶劑。

問:做肽類LC–MS 應選哪種酸?

答:優(yōu)先嘗試甲酸(FA)或甲酸銨。TFA可改善峰形,但會抑制ESI靈敏度;僅在必要時、并配合緩解策略(如柱后補加/“去抑制”處理)使用。

問:金屬雜質真的重要嗎?

答:重要——ppb級堿金屬/過渡金屬會導致加合物并降低靈敏度;請選擇具有ppb級ICP-MS金屬指標且MS本底干凈的批次。

為什么在UHPLC-MS工作中選擇阿拉丁

阿拉丁面向UHPLC–MS的溶劑/添加劑除通過MS本底與ppb級金屬的QC外,還完成梯度/UHPLC適用性核驗。配套的批次COA與幫助中心指引,方便按方法選擇合適等級,并對合規(guī)或已驗證的流程形成完備的文檔化佐證。

 

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